La leishmaniosi visceral (LV), coneguda com a kala-azar al subcontinent indi, és una malaltia parasitària causada pel protozou flagel·lat Leishmania que pot ser mortal si no es tracta ràpidament. El flebótoc Phlebotomus argentipes és l'únic vector confirmat de VL al sud-est asiàtic, on es controla mitjançant polvorització residual interior (IRS), un insecticida sintètic. L'ús del DDT en els programes de control de la VL ha donat com a resultat el desenvolupament de resistència en flebótomes, de manera que el DDT ha estat substituït per l'insecticida alfa-cipermetrina. No obstant això, l'alfa-cipermetrina actua de manera semblant al DDT, de manera que el risc de resistència dels flebótomes augmenta sota l'estrès causat per l'exposició repetida a aquest insecticida. En aquest estudi, es va avaluar la susceptibilitat dels mosquits salvatges i la seva descendència F1 mitjançant el bioassaig de l'ampolla CDC.
Vam recollir mosquits de 10 pobles del districte de Muzaffarpur de Bihar, Índia. Vuit pobles van continuar utilitzant alta potènciacipermetrinaper a la polvorització interior, un poble va deixar d'utilitzar cipermetrina d'alta potència per a la polvorització interior i un poble mai va utilitzar cipermetrina d'alta potència per a la polvorització interior. Els mosquits recollits es van exposar a una dosi de diagnòstic predefinida durant un temps definit (3 μg/ml durant 40 min), i la taxa de derrocament i la mortalitat es van registrar 24 hores després de l'exposició.
Les taxes de mort de mosquits salvatges van oscil·lar entre el 91,19% i el 99,47%, i les de les seves generacions F1 van oscil·lar entre el 91,70% i el 98,89%. Vint-i-quatre hores després de l'exposició, la mortalitat dels mosquits salvatges va oscil·lar entre el 89,34% i el 98,93%, i la de la seva generació F1 va oscil·lar entre el 90,16% i el 98,33%.
Els resultats d'aquest estudi indiquen que es pot desenvolupar resistència a P. argentipes, la qual cosa indica la necessitat d'un seguiment i vigilància continuats per mantenir el control un cop aconseguida l'eradicació.
La leishmaniosi visceral (LV), coneguda com a kala-azar al subcontinent indi, és una malaltia parasitària causada pel protozou flagel·lat Leishmania i transmesa a través de la picada de femelles infectades (Díptera: Myrmecophaga). Les mosques de la sorra són l'únic vector confirmat de VL al sud-est asiàtic. L'Índia està a punt d'aconseguir l'objectiu d'eliminar VL. Tanmateix, per mantenir unes taxes d'incidència baixes després de l'eradicació, és fonamental reduir la població de vectors per prevenir la possible transmissió.
El control dels mosquits al sud-est asiàtic s'aconsegueix mitjançant la polvorització residual interior (IRS) amb insecticides sintètics. El comportament de repòs secret de les potes platejades el converteix en un objectiu adequat per al control d'insecticides mitjançant la polvorització residual interior [1]. La polvorització residual a l'interior de diclorodifeniltricloroetan (DDT) sota el Programa Nacional de Control de la Malària a l'Índia ha tingut efectes significatius en el control de les poblacions de mosquits i la reducció significativa dels casos de VL [2]. Aquest control no planificat de la VL va impulsar el Programa d'Eradicació de la VL de l'Índia a adoptar la polvorització residual en interiors com a mètode principal de control de Silverlegs. El 2005, els governs de l'Índia, Bangla Desh i Nepal van signar un memoràndum d'entesa amb l'objectiu d'eliminar la VL el 2015 [3]. Els esforços d'eradicació, que implicaven una combinació de control vectorial i diagnòstic i tractament ràpid de casos humans, tenien com a objectiu entrar en la fase de consolidació el 2015, un objectiu revisat posteriorment al 2017 i després al 2020.[4] El nou full de ruta global per eliminar les malalties tropicals desateses inclou l'eliminació de la VL per al 2030.[5]
A mesura que l'Índia entra en la fase posterior a l'eradicació del BCVD, és imprescindible assegurar-se que no es desenvolupi una resistència significativa a la beta-cipermetrina. El motiu de la resistència és que tant el DDT com la cipermetrina tenen el mateix mecanisme d'acció, és a dir, tenen com a objectiu la proteïna VGSC [21]. Així, el risc de desenvolupament de resistència en flebotòcs es pot augmentar per l'estrès causat per l'exposició regular a cipermetrina altament potent. Per tant, és imprescindible controlar i identificar les poblacions potencials de flebótocs resistents a aquest insecticida. En aquest context, l'objectiu d'aquest estudi va ser controlar l'estat de susceptibilitat dels flebótomes salvatges mitjançant dosis diagnòstiques i durades d'exposició determinades per Chaubey et al. [20] va estudiar P. argentipes de diferents pobles del districte de Muzaffarpur de Bihar, Índia, que utilitzava contínuament sistemes de polvorització interior tractats amb cipermetrina (pobles IPS continus). Es va comparar l'estat de susceptibilitat de P. argentipes salvatges de pobles que havien deixat d'utilitzar sistemes de polvorització interior tractats amb cipermetrina (antics pobles IPS) i aquells que mai havien utilitzat sistemes de polvorització interior tractats amb cipermetrina (pobles no IPS) mitjançant el bioassaig de l'ampolla del CDC.
Es van seleccionar deu pobles per a l'estudi (Fig. 1; Taula 1), dels quals vuit tenien antecedents de polvorització contínua en interiors de piretroides sintètics (hipermetrina; designats com a pobles d'hipermetrina contínua) i tenien casos de VL (almenys un cas) en els darrers 3 anys. Dels dos pobles restants de l'estudi, un poble que no va implementar la polvorització interior de beta-cipermetrina (poblat de polvorització no interior) va ser seleccionat com a poble control i l'altre poble que tenia una ruixada interior intermitent de beta-cipermetrina (poblat de polvorització interior intermitent / antic poble de polvorització interior) es va seleccionar com a poble control. La selecció d'aquests pobles es va basar en la coordinació amb el Departament de Salut i l'equip de polvorització interior i la validació del Pla d'acció de microproducció interior al districte de Muzaffarpur.
Mapa geogràfic del districte de Muzaffarpur que mostra la ubicació dels pobles inclosos a l'estudi (1–10). Ubicacions de l'estudi: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. El mapa es va preparar amb el programari QGIS (versió 3.30.3) i Open Assessment Shapefile.
Les ampolles per als experiments d'exposició es van preparar segons els mètodes de Chaubey et al. [20] i Denlinger et al. [22]. Breument, es van preparar ampolles de vidre de 500 ml un dia abans de l'experiment i la paret interior de les ampolles es va recobrir amb l'insecticida indicat (la dosi diagnòstica d'α-cipermetrina era de 3 μg/ml) aplicant una solució d'acetona de l'insecticida (2, 0 ml) al fons, parets i tapa de les ampolles. Després, cada ampolla es va assecar amb un corró mecànic durant 30 minuts. Durant aquest temps, desenrosqueu lentament la tapa per permetre que l'acetona s'evapori. Després de 30 min d'assecat, treure el tap i girar l'ampolla fins que s'hagi evaporat tota l'acetona. A continuació, les ampolles es van deixar obertes per assecar-se durant la nit. Per a cada prova de rèplica, una ampolla, utilitzada com a control, es va recobrir amb 2,0 ml d'acetona. Totes les ampolles es van reutilitzar al llarg dels experiments després d'una neteja adequada segons el procediment descrit per Denlinger et al. i l'Organització Mundial de la Salut [22, 23].
L'endemà de la preparació de l'insecticida, 30-40 mosquits capturats a la natura (femelles famolencs) es van treure de les gàbies en vials i es van bufar suaument a cada vial. Es va utilitzar aproximadament el mateix nombre de mosques per a cada ampolla recoberta d'insecticida, inclòs el control. Repetiu això almenys de cinc a sis vegades a cada poble. Després de 40 minuts d'exposició a l'insecticida, es va registrar el nombre de mosques abatudes. Totes les mosques es van capturar amb un aspirador mecànic, es van col·locar en recipients de cartró pintats coberts amb malla fina i es van col·locar en una incubadora separada sota les mateixes condicions d'humitat i temperatura amb la mateixa font d'aliment (pilotes de cotó remullats en una solució de sucre al 30%) que les colònies no tractades. La mortalitat es va registrar 24 hores després de l'exposició a l'insecticida. Tots els mosquits es van disseccionar i examinar per confirmar la identitat de l'espècie. El mateix procediment es va realitzar amb les mosques de descendència F1. Les taxes de derrocament i mortalitat es van registrar 24 hores després de l'exposició. Si la mortalitat a les ampolles de control era < 5%, no es va fer cap correcció de mortalitat a les rèpliques. Si la mortalitat a l'ampolla de control era ≥ 5% i ≤ 20%, la mortalitat a les ampolles de prova d'aquesta rèplica es va corregir mitjançant la fórmula d'Abbott. Si la mortalitat en el grup control superava el 20%, es descartava tot el grup de prova [24, 25, 26].
Mortalitat mitjana dels mosquits P. argentipes capturats a la natura. Les barres d'error representen errors estàndard de la mitjana. La intersecció de les dues línies horitzontals vermelles amb el gràfic (90% i 98% de mortalitat, respectivament) indica la finestra de mortalitat en la qual es pot desenvolupar la resistència.[25]
Mortalitat mitjana de la descendència F1 de P. argentipes capturats en estat salvatge. Les barres d'error representen errors estàndard de la mitjana. Les corbes tallades per les dues línies horitzontals vermelles (90% i 98% de mortalitat, respectivament) representen el rang de mortalitat sobre el qual es pot desenvolupar la resistència[25].
Es va trobar que els mosquits del poble control/no IRS (Manifulkaha) eren molt sensibles als insecticides. La mortalitat mitjana (± SE) dels mosquits capturats en estat salvatge 24 hores després de la derrocament i l'exposició va ser del 99,47 ± 0,52% i del 98,93 ± 0,65%, respectivament, i la mortalitat mitjana de la descendència F1 va ser del 98,89 ± 1,11% i 98,89 ± 1,11% i ± 2,13%, respectivament, 98,13. 3).
Els resultats d'aquest estudi indiquen que les mosques de la sorra amb potes platejades poden desenvolupar resistència a l'α-cipermetrina del piretroide sintètic (SP) als pobles on s'utilitzava habitualment l'α-cipermetrina piretroide (SP). En canvi, es va trobar que les mosques de sorra de potes platejades recollides de pobles no coberts pel programa de control/IRS eren molt susceptibles. El seguiment de la susceptibilitat de les poblacions de mosques de sorra salvatges és important per controlar l'eficàcia dels insecticides utilitzats, ja que aquesta informació pot ajudar a gestionar la resistència als insecticides. S'han informat regularment nivells elevats de resistència al DDT en mosques de la sorra de zones endèmiques de Bihar a causa de la pressió històrica de selecció de l'IRS que utilitza aquest insecticida [1].
Vam trobar que P. argentipes era molt sensible als piretroides, i els assaigs de camp a l'Índia, Bangla Desh i Nepal van demostrar que l'IRS tenia una alta eficàcia entomològica quan s'utilitzava en combinació amb cipermetrina o deltametrina [19, 26, 27, 28, 29]. Recentment, Roy et al. [18] va informar que P. argentipes havia desenvolupat resistència als piretroides al Nepal. El nostre estudi de susceptibilitat de camp va mostrar que les mosques de la sorra amb potes platejades recollides de pobles no exposats a l'IRS eren altament susceptibles, però les mosques recollides de pobles intermitents/antics IRS i continus (la mortalitat va oscil·lar entre el 90% i el 97%, excepte per a les mosques de la sorra d'Anandpur-Haruni, que tenien un 89,34% de mortalitat després d'una exposició a les 24 hores). Una possible raó per al desenvolupament d'aquesta resistència és la pressió exercida per la polvorització rutinària a l'interior (IRS) i els programes de polvorització local basats en casos, que són procediments estàndard per gestionar els brots de kala-azar a zones/blocs/pobles endèmics (Procediment operatiu estàndard per a la investigació i gestió de brots [30]. Malauradament, les dades històriques de susceptibilitat per a aquesta regió, obtingudes mitjançant el bioassaig de l'ampolla del CDC, no estan disponibles per a la comparació. els flebótomes no està clar perquè els flebótomes volen amb menys freqüència que els mosquits i passen més temps en contacte amb el substrat en el bioassaig [23].
Els piretroides sintètics s'han utilitzat a les zones endèmiques de VL del Nepal des de 1992, alternant-se amb els SP alfa-cipermetrina i lambda-cihalotrina per al control del flebótoc [31], i la deltametrina també s'ha utilitzat a Bangla Desh des del 2012 [32]. La resistència fenotípica s'ha detectat en poblacions salvatges de flebótomes platejats en zones on s'han utilitzat piretroides sintètics durant molt de temps [18, 33, 34]. S'ha detectat una mutació no sinònima (L1014F) a les poblacions salvatges del flebótoc de l'Índia i s'ha associat amb la resistència al DDT, cosa que suggereix que la resistència als piretroides sorgeix a nivell molecular, ja que tant el DDT com el piretroide (alfa-cipermetrina) es dirigeixen al mateix gen en el sistema nerviós de l'insecte [17, 34]. Per tant, l'avaluació sistemàtica de la susceptibilitat a la cipermetrina i el seguiment de la resistència dels mosquits són essencials durant els períodes d'eradicació i posteradicació.
Una limitació potencial d'aquest estudi és que vam utilitzar el bioassaig del vial CDC per mesurar la susceptibilitat, però totes les comparacions van utilitzar resultats d'estudis anteriors mitjançant el kit de bioassaig de l'OMS. Els resultats dels dos bioassaigs poden no ser directament comparables perquè el bioassaig del vial CDC mesura la derrota al final del període de diagnòstic, mentre que el bioassaig del kit de l'OMS mesura la mortalitat a les 24 o 72 hores després de l'exposició (aquest últim per a compostos d'acció lenta) [35]. Una altra limitació potencial és el nombre de pobles de l'IRS en aquest estudi en comparació amb un poble que no sigui IRS i un altre que no sigui IRS/antic poble de l'IRS. No podem suposar que el nivell de susceptibilitat del vector dels mosquits observat a pobles individuals d'un districte sigui representatiu del nivell de susceptibilitat d'altres pobles i districtes de Bihar. A mesura que l'Índia entra en la fase posterior a l'eliminació del virus de la leucèmia, és imprescindible prevenir un desenvolupament significatiu de resistència. Es requereix un seguiment ràpid de la resistència a les poblacions de flebótomos de diferents districtes, blocs i àrees geogràfiques. Les dades presentades en aquest estudi són preliminars i s'han de verificar comparant-les amb les concentracions d'identificació publicades per l'Organització Mundial de la Salut [35] per tenir una idea més específica de l'estat de susceptibilitat de P. argentipes en aquestes zones abans de modificar els programes de control vectorial per mantenir poblacions baixes de flebótomos i donar suport a l'eliminació del virus de la leucèmia.
El mosquit P. argentipes, el vector del virus de la leucosi, pot començar a mostrar primers signes de resistència a la cipermetrina altament eficaç. El seguiment regular de la resistència als insecticides en poblacions salvatges de P. argentipes és necessari per mantenir l'impacte epidemiològic de les intervencions de control vectorial. La rotació d'insecticides amb diferents modes d'acció i/o l'avaluació i el registre de nous insecticides és necessària i recomanada per gestionar la resistència als insecticides i donar suport a l'eliminació del virus de la leucosi a l'Índia.
Hora de publicació: 17-feb-2025